中文名称:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
英文名称:5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside(X-Gal)
CAS号:7240-90-6
分子式:C14H15BrClNO6
分子量:408.63
外观:白色至淡黄色粉末
二、物理化学性质
溶解度:溶于二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)及水(部分混溶)。在DMSO中的溶解度约为20mg/mL。
密度:1.9±0.0 g/cm3
沸点:673.9±0.0 °C at 760 mmHg
熔点:230 °C
闪点:361.3±0.0 °C
三、储存条件
储存于0℃以下干燥处,避免光照。已配制的溶液应密封并避光保存在-20°C,使用时需在室温下平衡至少1小时。预配制的储备溶液最多可使用一个月。
四、生化机理
X-Gal是β-半乳糖苷酶的一种组织化学底物。在β-半乳糖苷酶的催化下,X-Gal会被裂解,生成一种不溶性的蓝色前沉淀物,随后该沉淀物会转化为强烈的蓝色产物。
五、科研应用
蓝白斑筛选:X-Gal是β-半乳糖苷酶的显色底物,常用于蓝白斑筛选实验中。在含有X-Gal和IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)的培养基上,当DNA片段插入至带有lacZ基因的载体并转化至lacZ缺失的细胞中后,根据长出的菌体颜色(白色为具有DNA插入片段的基因重组体,蓝色为非重组体)可以方便地挑选出基因重组体。
β-半乳糖苷酶活性检测:X-Gal还可用于检测β-半乳糖苷酶的活性。在β-半乳糖苷酶的催化下,X-Gal会产生蓝色产物,从而可以通过比色法或原位染色法检测β-半乳糖苷酶的存在和活性。
报告基因表达可视化:在转染真核细胞时,X-Gal可用于可视化β-半乳糖苷酶报告基因的表达。
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